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Analytischer Service

Ansprechpartner:

Prof. Dr. R. Geyer

Tel. 47400

generell Rücksprache erforderlich (sonst keine Probenannahme !)
Kohlenhydratanalytik, Lipidanalytik, MALDI-TOF-MS, nanoLC ESI-MS

 a: vom Kunden unter Anleitung durchzuführen; b: Service-Leistung

 

Strukturanalyse von Lipiden und Glykokonjugaten

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1 Bausteinanalyse

Zum Nachweis von Kohlenhydratanteilen and Lipiden oder Proteinen steht die Kohlenhydrat-Komponenten-Analyse zur Verfügung. Hierbei werden die einzelnen Monosaccharidbausteine erfaßt. Voraussetzung sind hochreine Proben.

Für die gaschromatographische Analyse der Alditolacetate liegt die benötigte Menge bei ca. 0.1 µg Kohlenhydrat-Anteil (Zeitbedarf: ca 1 Woche).

Für die HPLC-Bestimmung der Monosaccharide nach Derivatisierung mit Anthranilsäure werden ca. 20 ng/Monosaccharid benötigt (Zeitbedarf nach Vorabsprache: innerhalb eines Tages).

b

2 Methylierungsanalyse

Sollen neben den einzelnen Bausteinen auch noch die Verknüpfungspositionen der einzelnen Monosaccharid-Bausteine erfaßt werden, ist eine Methylierungsanalyse nötig. (Mindestbedarf ca. 1 µg Kohlenhydrat-Anteil; Zeitbedarf: ca. 1 Woche)

b

3 MALDI-TOF-MS

Zur massenspektrometrischen Analyse von Oligosacchariden und Glykoproteinen steht mit der Matrix-unterstützten Flugzeitmassenspektrometrie eine hochempfindliche Methode zur Verfügung (Massenbereich 300-200000 Da). Der Probenbedarf liegt bei ca. 5-10 pmol (in einem µl-Lösung). Die Proben müssen jedoch salz- und detergenzienfrei sein. (Zeitbedarf: 1-2 Tage)

b

4 ESI-MS

Der Massenbereich der Elektrospray-Massenspektrometrie liegt zwischen 50 und 3000 Da. Der Probenbedarf liegt im niederen Picomol-Bereich. (Zeitbedarf: 1 Woche)

a

5 Abbau mit Exoglykosidasen

Die sequenzielle Abfolge der einzelnen Monosaccharide und die anomere Konfiguration der glykosidischen Bindungen lassen sich mit Hilfe von Enzymen bestimmen. Hierfür existieren Standardprotokollen für Glykolipide und Oligosaccharide.

b

6 Fettsäureanalytik

Fettsäuren können als Fettsäuremethylester durch Gaschromatographie und kombinierte Gaschromatographie-Massenspektrometrie identifiziert werden. Es können C4-C30 Fettsäuren analysiert werden. Der Probenbedarf liegt bei ca. 1µg/Fettsäure. (Zeitbedarf: 1-2 Tage)

b

7 Sphingoid-Basen-Analytik

Langkettige Aminoalkohole können nach oxidativer Spaltung in Form von Fettsäuren bezüglich ihrer Alkylkettenstruktur analysiert werden (Probenbedarf: mind. 10 µg; Zeitbedarf: 1-2 Wochen).


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